期刊简介
本刊创刊于1980年，是由四川省卫生厅主管，四川省医学会主办的综合性医学专业性期刊。本刊为月刊，A4开本，国内外公开发行（刊号：ISSN 1004－0501，CN 51－1144/R），曾多次被评为“四川省优秀期”称号。本刊现已为《中国期刊网》、《中国学术期刊（光盘版）》全文收录，并为中国学术期刊综合评价数据库“来源期刊”、中文科技期刊数据库期刊、万方数据－－数字化期刊群入网期刊、被《中国核心期刊（遴选）数据库》收录。本刊宗旨是促进四川省内外医学学术交流，传递医学信息，为广大读、作者服务。面向临床医学为主，全面反映四川乃至国内的其他省市的医学学术动态、水平。读者主要为省、市、县级医疗机构的医务人员、管理人员，具有容量大，出版周期短，发表文稿多、快，发行量大的特点。
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首页>四川医学杂志
- 杂志名称：四川医学杂志
- 主管单位：四川省卫生厅
- 主办单位：四川省医学会
- 国际刊号：1004-0501
- 国内刊号：51-1144/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：多次获“四川省优秀期刊”期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美)
复制型HBV重组腺病毒的制备
尹华；周陶友；李红；王月宾；韩红霞；唐红
关键词：AdEasy系统, 腺病毒, 乙肝病毒, 同源重组, 细菌
摘要：目的 通过细茼体内同源重组方法,构建含1.3拷贝HBV DNA片段(HBV4.1)的HBV复制型重组腺病毒.方法 从质粒pTh-HBV4.1上获取HBV4.1片段,插入腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack-CMV中,构建含HBV4.1的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/HBV4.1.然后在大肠杆菌BJ5183内与pAdEasy-1进行同源重组,形成重组腺病毒质粒pAd-GFP/HBV4.1,经脂质体2000转染HEK293细胞进行包装和扩增,获得腺病毒Ad-CFP/HBV4.1.通过荧光显微镜下观察GFP绿色荧光蛋白的表达,检测腺病毒滴度和感染效率;采用PCR法检测腺病毒DNA上有无HBV基因组存在.结果 经酶切鉴定确认含HBV穿梭质粒pAdTrack-CMV/HBV4.1和重组腺病毒基因组质粒pad-GFP/HBV4.1构建成功;GFP荧光检测提示重组腺病毒Ad-GFP/HBV4.1已成功包装;PCR扩增表明重组腺病毒内携带有HBV DNA片段.在HEK293细胞中获得的病毒滴度可达(4.2～4.8)×107 efu/ml;当MOI为100时,感染HEK293细胞的效率>90%.结论 成功构建了携带1.3拷贝HBV基因组的重组腺病毒Ad-GFP/HBV4.1,为进一步建立高水平HBV复制型细胞和动物模型以用于HBV生物学特性的研究英定了基础.
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